本研究构建的shRNA-PAX6慢病毒重组载体能在分子水平有效的沉默靶基因，为进一步研究PAX6基因的功能奠定了实验基础，PAX6有望成为临床治疗胶质瘤患者的潜在靶点。
Nov 7, 2022 · 质粒未去内毒素，不可直接转染细胞承诺转染效率达到80%的情况下，至少有一条干扰效率达到70%。 载体构建. shRNA载体构建四保一（即用型、送NC）. 套.
1.2.1. 人NF-κBp65 shRNA慢病毒载体构建 根据GenBank中人NF-κBp65基因序列，从invitrogen公司合成shRNA片段，其中在5'端引入一个BamHI位点，3'端引入一个XhoI位点和一个EcoRI位点，所设计乱序对照序列（scramble）和干扰序列（shRNA）见表1。
慢病毒shRNA干扰载体系统是一种非常高效的，能稳定干扰各种哺乳动物细胞靶基因表达的载体工具。一旦病毒基因组被逆转录成DNA并永久整合到宿主细胞基因组中， ...
携带shRnA慢病毒质粒的慢病毒宿主范围广，能感染分裂期与非分裂期细胞，转染效率高，shRnA在宿主细. 胞中能高效、长期稳定地表达，因此shRnA慢病毒载体正被越来越广泛 ...
1.两个MSTN-shRNA慢病毒载体的构建方法，其特征在于：根据GeneBank中绵羊MSTN基因从启始密码ATG至终止密码TGA共1128bp编码区序列，人工设计合成并筛选到两条对绵羊MSTN基因有显著抑制作用的shRNA分子，该分子是由核苷酸组成的特定序列，且一条shRNA分子由上下游两条DNA互补单链组成，其 ...
本发明构建的人WIPI2‑shRNA慢病毒载体，将载体质粒转染后得到包装并浓缩的病毒，病毒再侵染目的细胞，实现了WIPI2基因干扰，降低WIPI2基因的表达，降低被病毒侵袭的细胞 ...
... 载体生成慢病毒构建体。 使用得到的慢病毒表达构建体pLenti6/V5-GW/+EmGFP-miR-lacZ，生成miR 对照慢病毒储备液（靶向lacZ 的miRNA）。 生成后，可将miR 对照慢病毒转 ...
何为shRNA？ shRNA 是慢病毒构建体LTR 区域内的短发夹序列。LTR-LTR 区域整合到宿主基因组中后，由细胞生成shRNA并穿梭到细胞质中，并在此被Dicer 酶复合物切割。
综合以上结果，siRNA-1043抑制效果显著，筛选为shRNA候选序列，合成后用于制备慢病毒。 将干扰效率较高的siRNA-1043和siRNA-1218的寡核苷酸序列合成shRNA，退火后与经ClaⅠ和MluⅠ双酶切的慢病毒骨架质粒pLVTHM连接，构建pLVTHM-3DshRNA重组质粒。